cck8細胞增殖檢測試劑盒的檢測依賴(lài)于脫氫酶催化的反應，如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性，可在加CCK-8之前更換新鮮培養基，去掉藥物的影響。若藥物影響比較小的情況可以不更換培養基，直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸光度即可。
 

　　cck8細胞增殖檢測試劑盒的操作說(shuō)明：
 

　　1、在96孔板中接種細胞懸液(100μL/孔)，通常細胞增殖實(shí)驗每孔約2000個(gè)細胞，細胞毒性實(shí)驗每孔約5000個(gè)細胞(具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等因素決定)。
 

　　2、按照實(shí)驗需要，進(jìn)行培養并給予0-10μL特定的藥物刺激，并孵育一段時(shí)間(例如:6、12、24或48小時(shí))。
 

　　3、向每孔加入10μLCCK-8溶液。如果起始的培養體積為200μL，則需加入20μLCCK-8溶液，以此類(lèi)推。
 

　　4、在細胞培養箱內繼續孵育1-4小時(shí)，具體時(shí)間可以通過(guò)預實(shí)驗確定。
 

　　5、用酶標儀測定在450nm處的吸光值，若無(wú)450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片，但是450nm檢測靈敏度最高。如果樣品為高渾濁度的細胞懸液，可以使用大于600nm的波長(cháng)，例如650nm，作為參考波長(cháng)進(jìn)行雙波長(cháng)測定。
 

　　6、如果需要暫時(shí)不測定O.D值，可以向每孔中加入10μL0.1MHCl溶液或者1%w/v的SDS溶液，避光保存在室溫，24小時(shí)內吸光度不會(huì )發(fā)生變化。