蘇木素染色液的染色原理,快來(lái)看一看吧!
更新時(shí)間:2022-09-17 點(diǎn)擊次數:5958次
1、核染色原理:蘇木精是一種堿性天然染料,可以染色細胞核。細胞核中的染色質(zhì)主要由DNA組成。在DNA雙螺旋結構中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基團向外,使DNA雙螺旋的外側帶負電并呈酸性。通過(guò)與帶有離子鍵或氫鍵的帶正電的蘇木精堿性染料結合,容易染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍色,因此細胞核被染成藍色。
2、細胞質(zhì)染色原理:曙紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,可以在一定條件下對細胞質(zhì)進(jìn)行染色。細胞質(zhì)的主要成分是蛋白質(zhì),它是一種兩性化合物。細胞質(zhì)的染色與染料溶液的pH值密切相關(guān)。當染色溶液的pH值低于細胞質(zhì)蛋白的等電點(diǎn)(4.7~5.0)時(shí),細胞質(zhì)蛋白以堿性形式電離,細胞質(zhì)帶正電荷,可以用帶負電荷的酸性染料染色。
3、分化:染色后,使用一些特定溶液去除組織中過(guò)量的染色劑。這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為微分,使用的溶液稱(chēng)為微分溶液。在HE染色中,通常使用1%鹽酸乙醇作為分化溶液。因為酸可以破壞蘇木精的醌結構,它可以將組織與色素分離并褪色。
4、藍色回復:分化后,蘇木精在酸性條件下呈紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下,它處于藍色離子狀態(tài),是藍色的。用酸性乙醇將組織切片分化成紅色或粉紅色后,立即用水去除組織切片上的酸并停止分化。然后用弱堿性水使蘇木精染色的細胞核呈藍色。這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為發(fā)藍或發(fā)藍。此外,它還可以使細胞核在不浸泡的情況下變藍,但需要很長(cháng)時(shí)間。