使用細胞凍存液,你需要注意這些事項!
更新時(shí)間:2021-06-30 點(diǎn)擊次數:1129次
為了將每一種有生命的細胞較好的保存其原有的細胞特性或者長(cháng)久的保存種質(zhì)資源,實(shí)驗人員往往將細胞用特殊配置的
細胞凍存液保存,使得細胞暫時(shí)脫離生長(cháng)狀態(tài),等到實(shí)驗需要的時(shí)候再從液氮中取出復蘇應用。
細胞凍存液凍存細胞健康程度一般要求活細胞在95%以上,細胞活力差的在凍存后的成活機率很小,因此,一定要在細胞旺盛分裂時(shí)期凍存。凍存液凍存需要一段時(shí)間,如果這段時(shí)間凍存管傾斜,液體容易流到管口,很容易在后續的操作中造成污染。具體操作時(shí),凍存管直立起來(lái)放在冰箱里,這樣不容易造成污染。同時(shí)凍存細胞的時(shí)候,一定加上封口膜,這樣可以避免復蘇的時(shí)候,水浴箱里的水進(jìn)入蓋子的縫隙中。凍存管外面用封口膜封上后,最好再用白膠布再封一下。這樣可以防止細胞復蘇時(shí),封口膜崩裂,水浴箱中的水進(jìn)入凍存管。
細胞凍存液的使用注意事項:
1.使用前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì )破壞它的分子結構,以至于降低冷凍保護效果。
2.在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時(shí)最好戴上手套操作。
3.混合DMSO要快,因為DMSO對細胞有毒性,混合之后應盡快凍存,提醒各位注意的是加入凍存液后一定要混勻,防止DMSO沉淀。
4.凍存液比例培養基7:血清2:DMSO1,也有將血清比例加大的做法,有的甚至將血清提高到90%,具體濃度視經(jīng)驗而定。
5.可以先在泡沫上打孔,把凍存管塞進(jìn)去。這樣降溫可以慢一點(diǎn),當然包上棉花也是不錯的主意。
6.注意定期檢查液氮罐內液氮量,及時(shí)添加。